Análise de Advantame em Alimentos por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência

Análise do advantame em aditivos alimentares

Este experimento foi realizado com referência ao "GB 1886.377-2024 National Food Safety Standard - Food Additive Advantame",utilizando o sistema de cromatografia líquida de alto desempenho da série LC3200 da Wayeal (HPLC) equipado com detector UV para análiseOs resultados experimentais demonstraram uma excelente adequação do sistema, com uma forma de pico bem para ácido benzoico e advantame.e os elevados números teóricos das placas confirmaram a conformidade com todos os requisitos de ensaioO coeficiente de correlação linear excedeu 0.999O experimento mostrou uma excelente repetibilidade, com desvios padrão relativos (DRS) de tempo de retenção de 0,027% para o ácido benzoico e 0,049% para o advantame, e DRS de área de pico de 0,184% e 0,133%, respectivamente.respectivamenteOs limites teóricos de detecção são 0,066 mg/L para o ácido benzoico e 0,113 mg/L para o advantame.Todos os dados analíticos preencheram os requisitos de desempenho instrumental especificados na metodologia farmacopéia.

Palavras-chave: Advantame, cromatografia líquida de alto desempenho, detector UV.

1Método experimental

1.1 Configuração dos instrumentos

Tabela 1 Lista de configurações do sistema HPLC

1.2 Materiais de experimentação e equipamento auxiliar

Acetonitrilo: de qualidade cromatográfica

Padrão de ácido benzoico

Padrão de advantame

1.3 Condições de ensaio

Quadro 2 Condições de análise HPLC

1.4 Preparação da solução

1.4.1 Solução padrão interna

Pesar com precisão 40 mg de ácido benzoico, dissolver num solvente misturado com água e acetonitrilo e diluir com precisão até 50 ml.

1.4.2 Solução padrão

Pesar com precisão 40 mg de advantame, dissolver num solvente misturado de água e acetonitrilo e diluir com precisão até 50 ml para preparar uma solução básica padrão de 0,8 mg/ml.e 12 ml da solução de base padrão em cinco frascos volumétricos separadosAdicionar 5 ml de solução padrão interna a cada frasco, diluir para 50 ml com solvente misturado de água e acetonitril para preparar soluções de trabalho padrão em concentrações de 0,128 mg/ml, 0,144 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,05 mg/ml, 0,160 mg/ml, 0,176 mg/mL e 0,192 mg/mL para a construção da curva de calibração.

1.4.3 Preparação de amostras

Pesar com precisão 40 mg da amostra de ensaio, dissolver num solvente misturado com água e acetonitrilo e diluir com precisão até 50 ml. Pipetar 10 ml da solução preparada num frasco volumétrico,adicionar 5 ml da solução-padrão internaFiltrar a solução através de um filtro de membrana para ensaio.

2Resultados e discussão

2.1 Adequação do sistema

Figura 1 Cromatograma de ensaio de adequação do sistema

Quadro 3 Dados do ensaio de adequação do sistema

Nota: Tal como indicado no quadro anterior, o ensaio de adequação do sistema mostrou excelentes picos de forma tanto para o ácido benzoico como para o advantame, com fatores de queda inferiores a 1.2A resolução ultrapassou 1.5, e os elevados números teóricos das placas satisfaziam plenamente os requisitos do método analítico.

2.2 Ensaio da curva de calibração

Fig. 2 Relatório de ensaio da curva de calibração do advantame

Observação: Os resultados experimentais demonstraram uma excelente linearidade para a quantificação do advantame, com um coeficiente de correlação (R2) superior a 0.999, que satisfaçam os requisitos do experimento.

2.3 Ensaios de repetibilidade

Fig. 3 Cromatograma de ensaio de repetibilidade de seis injecções

Quadro 4 Dados do ensaio de repetibilidade do ácido benzoico (6 injecções)

Quadro 5 Dados do ensaio de repetibilidade do advantame (6 injecções)

Nota: A partir dos dados do quadro acima, a repetibilidade do tempo de retenção do ácido benzoico e da advantame é de 0,027% e 0,049%, e a repetibilidade da área de pico é de 0,184% e 0,133%, respectivamente,que demonstre boa repetibilidade.

2.4 Ensaios dos limites de detecção

Fig. 4 Cromatograma do ácido benzoico 0,8 mg/L e da solução padrão de advantame 1,28 mg/L

Quadro 6 Resultados dos ensaios para a solução-padrão de ácido benzoico de 0,8 mg/l e de advantame de 1,28 mg/l contendo

Nota: De acordo com os dados do ensaio de amostra padrão do quadro acima, com uma concentração de ácido benzoico de 0,8 mg/l e uma concentração de advantame de 1,28 mg/l,Os limites teóricos de detecção do ácido benzoico e do advantame, calculados com base numa relação sinal/ruído de três vezes, são, respectivamente, 0,066 mg/L e 0,113 mg/L.

2.5 Ensaios de bebidas de marca

Fig. 5 Cromatograma de uma bebida de marca

Nota: Não foi detectada advantame na bebida de marca testada.

3Conclusão

Este experimento foi realizado em conformidade com o “GB 1886.377-2024 National Food Safety Standard - Food Additive Advantame”, utilizando o sistema Wayeal LC3200 de cromatografia líquida de alto desempenho,equipado com um detector UV para análiseOs resultados experimentais demonstraram uma excelente adequação do sistema, com uma forma de pico bem para ácido benzoico e advantame.e os elevados números teóricos das placas confirmaram a conformidade com todos os requisitos de ensaioO coeficiente de correlação linear excedeu 0.999O experimento mostrou uma excelente repetibilidade, com desvios padrão relativos (DRS) de tempo de retenção de 0,027% para o ácido benzoico e 0,049% para o advantame, e DRS de área de pico de 0,184% e 0,133%, respectivamente.respectivamenteOs limites teóricos de detecção são 0,066 mg/L para o ácido benzoico e 0,113 mg/L para o advantame.Todos os dados analíticos preencheram os requisitos de desempenho instrumental especificados na metodologia farmacopéia.