Determinação de Resíduos de Glifosato e Quatro Pesticidas e Seus Metabólitos em Maçãs por Cromatografia Líquida-Espectrometria de Massa em Tandem Wayeal LCMS-TQ9200

O glifosato, o glufosinato, o etefon e outros quatro pesticidas, juntamente com seus metabólitos, são amplamente utilizados no cultivo de plantas devido à sua alta eficiência e efeitos herbicidas e de amadurecimento de amplo espectro, tornando-os importantes insumos agrícolas para garantir o rendimento das colheitas e melhorar a eficiência agrícola.

A China estabeleceu limites máximos de resíduos (LMRs) para glifosato e outros pesticidas em alimentos de origem vegetal. Portanto, o desenvolvimento de um método de detecção sensível, preciso e eficiente é de grande importância prática para garantir a qualidade e a segurança dos produtos agrícolas, regular as práticas de produção agrícola e proteger a saúde do consumidor.

Atualmente, os métodos de detecção de glifosato e outros três pesticidas, juntamente com seus metabólitos em alimentos de origem vegetal, incluem principalmente cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), cromatografia gasosa (CG) e cromatografia iônica (CI).

Entre esses métodos, a CLAE é suscetível à adsorção da matriz; a CG requer a derivatização de analitos polares como o glifosato; e a CI sofre com problemas como baixa eficiência de separação e fraca capacidade anti-interferência. Essas limitações restringem sua ampla aplicação na detecção de resíduos em diferentes tipos de alimentos de origem vegetal, incluindo cereais, vegetais e chá.

A GB 23200.122-2026 estabelece um método de detecção para resíduos de glifosato, outros três pesticidas e seus metabólitos com base em LC-MS/MS. Ao otimizar as condições de pré-tratamento da amostra, os parâmetros de separação cromatográfica e os modos de detecção espectrométrica de massa, este método visa abordar os problemas comumente encontrados em métodos tradicionais, como alta interferência, baixa sensibilidade, operação complexa e fraca adaptabilidade à matriz. Ele permite a determinação rápida e precisa de resíduos de glifosato e dos quatro pesticidas e seus metabólitos em alimentos de origem vegetal, fornecendo assim suporte técnico confiável e referências padrão para controle de qualidade em empresas de produção agrícola, testes de rotina em instituições de inspeção e testes e inspeção de supervisão por autoridades reguladoras.

Palavras-chave: Sistema triplo quadrupolo LC-MS/MS, Maçã, Glifosato.

1. Instrumentos e Reagentes

1.1 Lista de Configuração do LCMS/MS

Tabela 1 Lista de Configuração do Instrumento

1.2 Reagentes e Padrões

Tabela 2 Lista de Reagentes e Padrões

1.3 Material Experimental e Equipamento Auxiliar

Vórtex

Balança de centésimo de milésimo

Centrífuga

Cartucho de Extração em Fase Sólida NovaChrom NovaPre HLB, 200mg/6mL

2. Método Experimental

2.1 Preparação de Soluções

2.1.1 Soluções de trabalho padrão de glifosato e outros quatro pesticidas e seus metabólitos: Diluir com precisão a solução padrão de glifosato e outros quatro pesticidas e seus metabólitos para 1mg/L, e então diluir com matriz de maçã em branco para preparar uma série de concentrações de curva de trabalho de 5μg/L, 10μg/L, 20μg/L, 50μg/L, 100μg/L, 200μg/L e 50μg/L.

2.2 Condições Experimentais

2.2.1 Condições de CLAE

Coluna: Coluna Especializada para Resíduos de Pesticidas NovaChrom NovaIC A4-P, 4*150mm, 5μm

Fase Móvel: Fase A: Água; Fase B: Solução de Bicarbonato de Amônio 200mmol/L – Solução de Amônia 0,05%

Taxa de Fluxo: 0,6mL/min

Temperatura da Coluna: 40°C

Volume de Injeção: 10μL

2.2.2 Condições de Espectrometria de Massa

Tabela 3 Parâmetros da Fonte de Íons da Espectrometria de Massa

3. Resultado Experimental

3.1 Cromatograma de Padrões

A determinação de glifosato e outros quatro pesticidas e seus metabólitos na matriz de maçã foi concluída em 15 minutos, com boas formas de pico, sem cauda de pico e respostas satisfatórias dos compostos, atendendo aos requisitos da análise experimental.

Fig 1 Cromatograma de Glifosato e Outros Quatro Pesticidas e Seus Metabólitos em Matriz de Maçã (200μg/L)

3.2 Faixa Linear

A solução padrão mista de glifosato e outros quatro pesticidas e seus metabólitos foi diluída em série com matriz de maçã em branco para preparar uma série de concentrações para a construção da curva padrão. A faixa linear para a maioria dos compostos foi de 5–500μg/L. O desvio entre os resultados da calibração linear e as concentrações conhecidas ficou dentro do desvio máximo permitido. Os coeficientes de correlação linear para todos os compostos foram superiores a 0,995, indicando boa linearidade.

Fig 2 Curvas de Calibração de Glifosato, Outros Quatro Pesticidas e Seus Metabólitos em Matriz de Maçã

3.3 Limite de Quantificação (LOQ)

As razões sinal-ruído para todos os compostos neste método no LOQ de 5 μg/L excedem 10, em conformidade com os critérios de sensibilidade padrão.

Tabela 4 Parâmetros de Espectrometria de Massa para Compostos

3.4 Teste de Precisão

Uma solução de matriz de maçã fortificada com glifosato e outros quatro pesticidas e seus metabólitos a 10μg/L foi injetada seis vezes consecutivas para avaliar a precisão. Os resultados são mostrados na tabela abaixo e atendem ao requisito de precisão de ≤10%.

Tabela 5 Precisão dos Compostos

Fig 3 Cromatogramas de Glifosato e Outros Quatro Pesticidas e Seus Metabólitos em Matriz de Maçã (10μg/L)

3.5 Teste de Amostra de Maçã

Amostras comerciais de maçã foram pré-tratadas seguindo o procedimento padrão e analisadas. Conforme mostrado na figura abaixo, nenhum composto alvo foi detectado.

Fig 4 Cromatogramas de Glifosato e Outros Quatro Pesticidas e Seus Metabólitos em Amostras de Maçã

4. Conclusão

Neste método, o sistema de cromatografia líquida-espectrometria de massa em tandem Wayeal LCMS-TQ9200 foi utilizado para a determinação de resíduos de glifosato e outros quatro pesticidas e seus metabólitos em maçãs. Os dados experimentais demonstram que o método fornece boas formas de pico cromatográfico sem cauda, sensibilidade que atende aos requisitos, coeficientes de correlação linear superiores a 0,995 para todos os compostos e precisão dentro de 10%. Nenhum carryover do sistema foi observado para amostras de alta concentração. Esses resultados indicam que o método, quando equipado com o sistema de cromatografia líquida-espectrometria de massa em tandem da Wanyi Technology, atende aos requisitos de detecção qualitativa e quantitativa de rotina para os analitos alvo.