Determinação dos componentes do açúcar nas oleaginosas por cromatografia iónica

Este estudo utiliza a cromatografia iónica para determinar o teor de frutose, glicose, sacarose, estaquiose e rafinose nas culturas oleaginosas.O autor utilizou um cromatógrafo iônico Wayeal equipado com um detector amperométricoEste método apresenta um pré-tratamento simples, uma excelente recuperação e uma elevada sensibilidade, tornando-o adequado para a determinação da frutose.,Teor de glicose, sacarose, estaquiose e rafinose nas oleaginosas, tal como especificado na norma.

Palavras-chave: sementes oleaginosas, cromatografia iónica, açúcares.

1Instrumentos e reagentes

1.1 Lista de configurações da cromatografia iónica

Quadro 1 Lista de configurações dos instrumentos

1.2 Reagentes e soluções-padrão

Quadro 2 Quadro de reagentes e normas

1.3 Material experimental e equipamento auxiliar

Configuração da filtragem

Limpeza ultra-sônica

Balança analítica (precisão de 0,0001 g)

Seringa descartável (2 ml)

Filtro de seringa aquosa (0,22 μm)

Água ultrapura, com uma resistividade de 18,2 MΩ·cm (25°C)

2Método experimental

2.1 Preparação da solução

2.1.1 Solução de acetato de zinco (1 mol/L): pesar 21,9 g de acetato de zinco, adicionar 3 ml de ácido acético glacial, dissolver e diluir em 100 ml com água.

2.1.2 Solução de ferrocianeto de potássio (1 mol/L): pesar 10,6 g de ferrocianeto de potássio, dissolver e diluir em 100 ml com água.

2.1.3 Solução de hidróxido de sódio (200 mmol/L): medir 10,5 ml de solução de hidróxido de sódio a 50%, diluir até 1000 ml com água pré-desgaseada e proteger com gás nitrogénio.

2.2 Pré-tratamento da amostra

2.2.1 Extração de amostras

Pesar 5 g da amostra (com precisão de 0,1 mg), colocá-la num tubo centrífugo de 50 ml com rolha, adicionar 25 ml de éter de petróleo, girar durante 1 minuto, centrífugar a 2000 r/min durante 5 minutos,e descartar a camada superior de éter de petróleoRepetir duas vezes os passos acima. Evaporar o éter de petróleo residual num banho de água a 60 °C. Transferir a amostra para um frasco cônico de 150 ml (anteriormente atingido um peso constante) utilizando uma haste de vidro.Enxaguar o tubo centrífugo duas vezes com 50 ml de águaAdicionar lentamente 5 ml de solução de acetato de zinco e 5 ml de solução de ferrocianeto de potássio, respectivamente.Adicionar água até que a massa total da solução seja de aproximadamente 100 g (com precisão de 1 mg). Após agitar a temperatura ambiente durante 30 minutos, filtrar a solução através de papel de filtro rápido qualitativo.Simultaneamente, realizar um ensaio em branco.

2.3 Condições de experimentação

2.3.1 Condições de cromatografia

Fase móvel: A: 200mM NaOH; B: água; C: 20mM NaOH

Taxa de fluxo: 0,4 ml/min

Tempo de funcionamento: 65 min.

Temperatura da coluna: 30°C

Temperatura da zona de detecção: 30°C

Eletrodo de ouro, açúcares, potencial quadruplo.

Volume de injecção: 10 μl

Tabela 3 Elução do gradiente

3Resultado do experimento.

3.1 Cromatograma padrão

A separação de cinco açúcares foi concluída em 20 minutos, com todos os picos apresentando boa forma, sem fenômenos de queda, e todos os compostos mostrando excelente resposta,que satisfaçam os requisitos de determinação experimental.

Fig. 1 Cromatograma de 5 açúcares (0,5 mg/l)

Quadro 4 Resultados da adequação do sistema

3.2 Alcance linear

Tomar uma quantidade adequada da solução-padrão misturada e proceder a uma diluição em série para preparar uma série de concentrações para a construção da curva-padrão.O desvio entre os resultados da detecção linear e as concentrações conhecidas é inferior ao desvio máximo admissívelOs valores de R2 variam de 0,99985 a 1.00000, indicando uma excelente linearidade para todos os componentes.

Quadro 5 Quadro de intervalo linear para cada composto

Fig. 2 Resultados lineares para cinco açúcares

3.3 Precisão

A solução da amostra de soja foi extraída em conformidade com o ponto 2.2.1 e analisadas nas condições instrumentais especificadas na secção 2.3.1 com seis injecções consecutivas. Os resultados são apresentados no quadro seguinte. Os desvios padrão relativos (DRS) dos cinco açúcares da amostra de soja foram todos inferiores a 1%.A detecção da amostra é fiável, e o método demonstra uma boa precisão.

Quadro 3 Resultados de precisão das amostras de soja

Fig. 3 Cromatogramas sobrepostos de quatro açúcares

3.4 Resultado do ensaio da amostra

3.4.1 Detecção de umidade

Tomar amostras de soja e de gergelim a ensaiar e determinar o teor de umidade nas amostras em conformidade com o GB/T 14489.1Os resultados são apresentados no quadro seguinte.

Quadro 4 Resultados da humidade da amostra

3.4.2 Ensaios de amostragem

Retirar as amostras de soja e de gergelim a analisar, extrair as soluções da amostra de acordo com o ponto 2.2.1, e realizar análises de injecção nas condições instrumentais especificadas na secção 2.3.1Os resultados dos testes de amostras são apresentados no quadro seguinte. A detecção de amostras de soja e de gergelim é fiável e os resultados são satisfatórios.

Quadro 5 Resultado do ensaio da amostra

Fig. 4 Cromatograma de ensaio de amostra de soja diluída 200 vezes

Fig. 5 Cromatograma de ensaio da amostra de gergelim diluída 100 vezes

4Conclusão

Este método utiliza um sistema de cromatografia iónica Wayeal da série IC6300 equipado com um detector amperométrico para estabelecer um método cromatográfico iónico para a determinação de frutose, glicose,açúcarAs amostras foram tratadas através de um pré-tratamento, separadas através de uma coluna de cromatografia iónica e quantificadas utilizando o método padrão externo,que permitam a análise qualitativa e quantitativa da frutoseOs dados indicam que todos os picos cromatográficos apresentam uma excelente forma sem cola,A sensibilidade cumpre os requisitos das normas nacionais, e os coeficientes de correlação lineares são todos superiores a 0.999Isto demonstra que o método, juntamente com o sistema de cromatografia iônica de Wanyeal, satisfaz os requisitos de detecção qualitativa e quantitativa de rotina para as amostras-alvo.