Determinação do polietileno glicol por cromatografia por permeação a gel
1Introdução
Objetivo: Determinação do peso molecular e da distribuição do polietileno glicol (PEG) por método de cromatografia por permeação por gel de alto desempenho (GPC).
Método:
Xtimate SEC-120, coluna de cromatografia por permeação por gel de 5 μm, 7,8x300 mm
Detector de índice de refração diferencial (RID)
Fase móvel: água ultrapura
Taxa de fluxo: 1,0 ml/min
Temperatura da coluna: 35 °C;
Volume de injecção: 10 μl.
As curvas de calibração são estabelecidas e os resultados do peso molecular e da distribuição de cada amostra são calculados pelo software GPC.
Resultado: A linearidade do PEG é boa quando o peso molecular está na faixa de 400-20000. A reprodutibilidade do experimento é boa, com 6 injeções consecutivas de PEG6000,o valor RSD do tempo de retenção é 00,105% e o valor RSD da área de pico é 0,335%.
Conclusão: A cromatografia por permeação por gel de alto desempenho (GPC) é um método fiável para a determinação do peso molecular e da distribuição do PEG,que tem as vantagens de ser preciso e de alta reprodutibilidade quando utilizado para avaliar a propriedade de polidispersidade dos compostos de polímeros.
Palavras-chave: HPLC, GPC, RID, Polímero, Polietileno Glicol
2Método experimental
2.1 Configuração dos instrumentos
Quadro 1 Lista de configurações do cromatógrafo líquido de alto desempenho
| - Não, não. |
Modular |
Quantidade |
| 1 |
Cromatografia líquida de alto desempenho série LC3200 |
1 |
| 2 |
PB3200 bomba binária |
1 |
| 3 |
RID3300 |
1 |
| 4 |
CT3200 Forno de coluna |
1 |
| 5 |
AS3200 Autosampler |
1 |
2.2 Condições de ensaio
Coluna de cromatografia: Xtimate SEC-120,5μm,7,8x300mm
Temperatura da coluna: 35°C
Detector: RID
Taxa de fluxo: 1,0 mL/min
Fase móvel: água
Volume de injecção: 10μL
2.3 Instrumento/Reagentes e Consumíveis
Reagentes:
Água ultrapura
Padrão: PEG400; PEG2000; PEG6000; PEG10000; PEG20000
Equipamento auxiliar
Balanças analíticas
Unidade de extracção de solventes
Limpeza ultra-sônica
Materiais experimentais
Membrana de filtragem: membrana de filtragem aquosa de 0,45 μm
2.4 Preparação da norma PEG
Pipeta 0,20 g de cada uma das normas PEG400, PEG2000, PEG6000, PEG10000 e PEG20000, adicionar 10 ml de água para dissolver, misturar bem e preparar a concentração de 20 mg/ml das amostras a testar.
3Resultado e discussão
3.1 Diferentes normas de peso molecular
Fig. 1 Cromatograma de PEG400
Quadro 1 Parâmetros cromatográficos do PEG400
| - Não, não. |
Compostos |
Tempo de conservação |
Área de pico |
Número da placa terical |
Fator de atraso |
| 1 |
PEG400 |
10.315 |
501.732 |
2346 |
1.185 |
Fig. 2 Cromatograma do PEG2000
Quadro 2 Parâmetros cromatográficos do PEG2000
| - Não, não. |
Compostos |
Tempo de conservação |
Área de pico |
Número teórico da matrícula |
Fator de atraso |
| 1 |
PEG2000 |
8.659 |
499.892 |
1926 |
1.230 |
Fig. 3 Cromatograma de PEG6000
Quadro 3 Parâmetros cromatográficos do PEG6000
| - Não, não. |
Compostos |
Tempo de conservação |
Área de pico |
Número teórico da matrícula |
Fator de atraso |
| 1 |
PEG6000 |
7.215 |
499.482 |
|
1.171 |
Fig. 4 Cromatograma de PEG10000
Quadro 4 Parâmetros cromatográficos do PEG10000
| - Não, não. |
Compostos |
Tempo de conservação |
Área de pico |
Número teórico da matrícula |
Fator de atraso |
| 1 |
PEG10000 |
6.612 |
483.657 |
2550 |
1.265 |
Fig. 5 Cromatograma de PEG20000
Quadro 5 Parâmetros cromatográficos do PEG20000
| - Não, não. |
Compostos |
Tempo de conservação |
Área de pico |
Número teórico da matrícula |
Fator de atraso |
| 1 |
PEG20000 |
6.081 |
497.803 |
1103 |
1.799 |
Fig. 6 Cromatogramas de sobreposição de diferentes pesos moleculares
Nota: Os dados acima mostram que o tempo de retenção do PEG20000 é de 6,081 minutos, e o PEG400 é de 10,315 minutos, as moléculas maiores são elutadas primeiro e as moléculas menores são elutadas mais tarde.
3.2 Repetibilidade
Fig. 7 Cromatogramas de sobreposição de repetibilidade de PEG6000 (n=6)
Quadro 7 Parâmetros cromatográficos de repetibilidade do PEG6000 (n=6)
| - Não, não. |
Amostragens |
Tempo de conservação |
Área de pico |
| 1 |
6000 |
7.233 |
498.821 |
| 2 |
6000 |
7.234 |
503.367 |
| 3 |
6000 |
7.225 |
499.891 |
| 4 |
6000 |
7.221 |
499.560 |
| 5 |
6000 |
7.219 |
501.374 |
| 6 |
6000 |
7.215 |
499.482 |
| Média |
- |
7.225 |
500.416 |
| RSD ((%) |
- |
0.105 |
0.335 |
Nota: A repetibilidade é boa. O RSD do tempo de retenção é de 0, 105% e o RSD da área de pico é de 0, 335% para 6 injecções de PEG6000.
3.3 Curvas normalizadas
Fig. 8 Curvas padrão Cromatogramas de diferentes pesos moleculares
Quadro 8 Curvas normalizadas Parâmetros cromatográficos de diferentes pesos moleculares
Nota: Os resultados do peso molecular e da distribuição de cada amostra são calculados por software GPC.000, e o coeficiente de correlação linear é 0.999.
4Conclusão
Este ensaio de polietileno glicol (PEG) é realizado por cromatografia em gel, utilizando um cromatógrafo líquido de alto desempenho da série LC3200 com detector de índice de refração diferencial.o tempo de retenção do PEG20000 é de 6A repetibilidade é boa. O RSD do tempo de retenção é 0.105% e o RSD da área de pico é 00,335% para 6 injecções de PEG6000.000, e o coeficiente de correlação linear é 0.9999A cromatografia por permeação por gel de alto desempenho (GPC) é um método fiável para a determinação do peso molecular e da distribuição do PEG,que possui as vantagens de resultados precisos e reproduzíveis quando utilizado para avaliar a propriedade de polidispersidade de compostos poliméricos.
Nota: A amostra deve ser deixada a temperatura ambiente durante mais de 12 horas e deve ser misturada suavemente, não utilizar ultra-som nem agitar vigorosamente para acelerar a dissolução.
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