Determinação da salidrosida em produtos farmacêuticos por cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC)

Resumo

Objecto: Determinação da salidrosida em produtos farmacêuticos por cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC)

Método: coluna C18, 4,6*250 mm, 5 μm;

comprimento de onda: 275 nm;

Fase móvel A: água; fase móvel B: metanol;

Taxa de fluxo 1,0 ml/min;

Temperatura: 30°C;

Volume de injecção: 5 μl.

Estabeleceu-se uma curva padrão e o conteúdo da meta foi calculado pelo método padrão externo.

Palavras-chave: HPLC, Detector UV, Ervas, Salidroside

1Método experimental

1.1 Configuração dos instrumentos

Wayeal LC3200 série HPLC

Tabela 1 Configuração do sistema da HPLC

1.2 Condições de ensaio

Coluna: C18, 5μm, 4,6*250 mm

Temperatura: 30°C

Comprimento de onda: 275nm

Taxa de fluxo: 1,0 ml/min

Fase móvel: A: água; B: metanol

Volume de injecção: 5μL

Condição do gradiente:

1.3 Instrumento, reagentes e consumíveis

Reagentes: água ultrapura, metanol ((GR)

Padrões: Salidrosida (99,7%)

Dispositivo auxiliar: balanço químico; filtro de solvente; produtos de limpeza ultrasónicos

Materiais experimentais: membrana de filtro: membrana de filtro de fase aquosa 0,45 μm

1.4 Preparação de soluções

1.4.1 Soluções-padrão: Colocar em um frasco volumétrico uma quantidade adequada de salidrosida-padrão e dissolvê-la em metanol para obter uma concentração de 0,0084125 mg/mL, 0,016825 mg/mL, 0,03365 mg/mL, 0,025 mg/mL, 0,016825 mg/mL, 0,03365 mg/mL.0673 mg/ ml, 0, 1346 mg/ ml, 0, 2692 mg/ ml, 0, 673 mg/ ml.

1.4.2 Preparação da amostra: Colocar 1,0022 g de amostra 1 num frasco volumétrico, adicionar metanol e dissolver até 25 ml. Colocar 1,0794 g de amostra 2 num frasco volumétrico, adicionar metanol e dissolver até 25 ml.

2 Resultados e discussão

2.1 Adequação do sistema

Fig. 1 Cromatograma do padrão de salidrosida

Quadro 2 Parâmetros cromatográficos das normas de salidrosida

Análise: Os resultados dos ensaios com salidrosida foram bons, com picos simétricos e elevado número teórico de placas.

2.2 Curva padrão

Fig. 2 Cromatograma sobreposto de soluções padrão de salidrosida

Fig. 3 Equação da curva e coeficiente de correlação das soluções padrão de salidrosida

Análise: A gama linear da curva padrão de salidrosida é boa, r> 0.999.

2.3 Repetibilidade

Fig. 4 Cromatograma de repetibilidade dos padrões de salidrosida (n=6)

Quadro 3 Parâmetros cromatográficos de repetibilidade Quadro de salidrosida (n=6)

Análise: 6 injecções de 0, 2692 mg/ l de salidrosida mostram boa reprodutibilidade e o valor RSD do tempo de retenção é de 0, 055% e o valor RSD da área de pico é de 0, 340%.

2.4 Amostra 1

Fig. 5 Cromatograma da amostra 1

Quadro 4 Parâmetros de cromatografia da amostra 1

Análise: O teor de salidrosida na amostra 1 foi de 0,061933 mg/ L, calculado de acordo com a equação da curva padrão.

2.5 Amostra 2

Fig. 6 Cromatograma da amostra 2