2024-09-11
Resumo
Objecto: Determinação da salidrosida em produtos farmacêuticos por cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC)
Método: coluna C18, 4,6*250 mm, 5 μm;
comprimento de onda: 275 nm;
Fase móvel A: água; fase móvel B: metanol;
Taxa de fluxo 1,0 ml/min;
Temperatura: 30°C;
Volume de injecção: 5 μl.
Estabeleceu-se uma curva padrão e o conteúdo da meta foi calculado pelo método padrão externo.
Palavras-chave: HPLC, Detector UV, Ervas, Salidroside
1Método experimental
1.1 Configuração dos instrumentos
Wayeal LC3200 série HPLC
- Não, não. | Nome | Quantidade |
1 | HPLC da série LC3200 | 1 |
2 | P3200 Bomba binária | 1 |
3 | Detector UV3200 | 1 |
4 | CT3200 Forno de coluna | 1 |
5 | AS3200 Autosampler | 1 |
Tabela 1 Configuração do sistema da HPLC
1.2 Condições de ensaio
Coluna: C18, 5μm, 4,6*250 mm
Temperatura: 30°C
Comprimento de onda: 275nm
Taxa de fluxo: 1,0 ml/min
Fase móvel: A: água; B: metanol
Volume de injecção: 5μL
Condição do gradiente:
T (min) | A Água (%) | B Metanol (%) |
0 | 95 | 5 |
15 | 90 | 10 |
35 | 85 | 15 |
36 | 95 | 5 |
50 | 95 | 5 |
1.3 Instrumento, reagentes e consumíveis
Reagentes: água ultrapura, metanol ((GR)
Padrões: Salidrosida (99,7%)
Dispositivo auxiliar: balanço químico; filtro de solvente; produtos de limpeza ultrasónicos
Materiais experimentais: membrana de filtro: membrana de filtro de fase aquosa 0,45 μm
1.4 Preparação de soluções
1.4.1 Soluções-padrão: Colocar em um frasco volumétrico uma quantidade adequada de salidrosida-padrão e dissolvê-la em metanol para obter uma concentração de 0,0084125 mg/mL, 0,016825 mg/mL, 0,03365 mg/mL, 0,025 mg/mL, 0,016825 mg/mL, 0,03365 mg/mL.0673 mg/ ml, 0, 1346 mg/ ml, 0, 2692 mg/ ml, 0, 673 mg/ ml.
1.4.2 Preparação da amostra: Colocar 1,0022 g de amostra 1 num frasco volumétrico, adicionar metanol e dissolver até 25 ml. Colocar 1,0794 g de amostra 2 num frasco volumétrico, adicionar metanol e dissolver até 25 ml.
2 Resultados e discussão
2.1 Adequação do sistema
Fig. 1 Cromatograma do padrão de salidrosida
- Não, não. | Composto | Tempo de conservação | Área de pico | Altura máxima | Fator de reboque | Número teórico da matrícula |
1 | Salidrosida | 36.262 | 812.469 | 31.885 | 1.035 | 45724 |
Quadro 2 Parâmetros cromatográficos das normas de salidrosida
Análise: Os resultados dos ensaios com salidrosida foram bons, com picos simétricos e elevado número teórico de placas.
2.2 Curva padrão
Fig. 2 Cromatograma sobreposto de soluções padrão de salidrosida
Fig. 3 Equação da curva e coeficiente de correlação das soluções padrão de salidrosida
Análise: A gama linear da curva padrão de salidrosida é boa, r> 0.999.
2.3 Repetibilidade
Fig. 4 Cromatograma de repetibilidade dos padrões de salidrosida (n=6)
- Não, não. | Amostra | Tempo de conservação | Área de pico |
1 | 0.2692mg/L solução-padrão | 36.265 | 807.365 |
2 | 36.262 | 812.469 | |
3 | 36.247 | 812.562 | |
4 | 36.224 | 815.145 | |
5 | 36.228 | 813.374 | |
6 | 36.272 | 814.529 | |
Média | 36.250 | 812.574 | |
RSD ((%) | 0.055 | 0.340 |
Quadro 3 Parâmetros cromatográficos de repetibilidade Quadro de salidrosida (n=6)
Análise: 6 injecções de 0, 2692 mg/ l de salidrosida mostram boa reprodutibilidade e o valor RSD do tempo de retenção é de 0, 055% e o valor RSD da área de pico é de 0, 340%.
2.4 Amostra 1
Fig. 5 Cromatograma da amostra 1
- Não, não. | Compostos | Tempo de conservação | Área de pico | Altura máxima | Fator de reboque | Número teórico da matrícula | concentração |
1 | Salidrosida | 36.201 | 185.337 | 7.335 | 1.038 | 47306 | 0.061933 mg/l |
Quadro 4 Parâmetros de cromatografia da amostra 1
Análise: O teor de salidrosida na amostra 1 foi de 0,061933 mg/ L, calculado de acordo com a equação da curva padrão.
2.5 Amostra 2
Fig. 6 Cromatograma da amostra 2
- Não, não. | Composto | Tempo de conservação | Área de pico | Altura máxima | Fator de reboque | Número teórico da matrícula | concentração |
1 | Salidrosida | 36.214 | 197.232 | 7.750 | 0.998 | 46217 | 0.065566 |
Quadro 4 Parâmetros de cromatografia da amostra 2
Análise: O teor de salidrosida na amostra 2 é de 0,065566 mg/l, calculado de acordo com a equação da curva padrão.
3Conclusão
O cromatógrafo líquido de alto desempenho da série Wayeal LC3200 com detector UV é utilizado para detectar o salidrosida; o resultado do ensaio é bom com picos simétricos e elevado número teórico de placas.O intervalo linear da curva padrão é bom, r> 0.999A repetibilidade é boa e 6 injecções de 0, 2692 mg/ l de salidrosida apresentam boa reprodutibilidade e o valor RSD do tempo de retenção é de 0, 055% e o valor RSD da área de pico é de 0, 340%.O teor de salidrosida na amostra 1 é de 00,061933 mg/l e o teor de salidrosida na amostra 2 é de 0,065566 mg/l, calculados de acordo com a equação da curva padrão.
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