2024-10-22
Determinação da 6-metilcumarina em cosméticos por cromatografia líquida
1.1 Configuração dos instrumentos
Quadro 1 Lista de configurações da cromatografia líquida
- Não, não. | Modulo | Quantidade |
1 | PB3210 Bomba binária | 1 |
2 | CT3400 Forno de coluna | 1 |
3 | AS3210 Autosampler | 1 |
4 | Detetor UV3210 | 1 |
5 | NovaChrom SC18 4,6*250 mm, 5 μm | 1 |
6 | Estação de Trabalho SmartLab | 1 |
1.2 Método experimental
1.2.1 Reagentes
Quadro 2 Lista de reagentes
- Não, não. | Reagentes | Purificação |
1 | Metanol | Grau cromatográfico |
2 | 6-metilcoumarina | 99% |
3 | Fosfato de di-hidrogénio de amónio | AR |
4 | Ácido fosfórico | GR |
1.2.1.1 Solução de base de 6-metilcoumarina (1000 mg/l): tomar a quantidade adequada de 6-metilcoumarina-padrão,dissolvido e fixado em volume com metanol e preparado numa concentração de 1000 mg/l de solução básica padrão.
1.2.1.2 Solução de trabalho padrão de 6-metilcumarina:Pipetar uma quantidade adequada de 6-metilcoumarina em solução básica padrão e diluir com metanol para preparar uma série de curvas de trabalho com concentrações de 0.1mg/L, 0,5mg/L, 1,0mg/L, 3,0mg/L, 5,0mg/L e 10,0mg/L, respectivamente.
1.2.1.3 Solução tampão de dihidrogénio-fosfato de sódio: tomar 3,12 g de dihidrogénio-fosfato de sódio, adicionar água para dissolver e diluir até 1000 ml e ajustar o pH do ácido fosfórico para 3.5.
1.2.2 Condições de cromatografia
Quadro 3 Condições de cromatografia
Coluna de cromatografia | NovaChrom SC18 4,6*250 mm 5 μm | ||
Fase móvel | A: metanol,B:solução tampão de fosfato de di-hidrogénio sódico | ||
Taxa de fluxo | 1 ml/min | ||
Temperatura da coluna | 35°C | Comprimento de onda | 275 nm |
Volume de injecção | 10 μl |
Quadro 4 Programa de Elução do Gradiente
Tempo (min) | Fase A móvel | Fase B móvel |
0 | 55 | 45 |
11 | 55 | 45 |
12 | 90 | 10 |
40 | 90 | 10 |
41 | 55 | 45 |
50 | 55 | 45 |
1.2.3 Pré-tratamento da amostra
Retirar 1 g (com precisão de 0,001 g) da amostra num frasco volumétrico de 10 ml, adicionar 5 ml de metanol, agitar e agitar para misturar completamente a amostra com a solução de extracção, extracção por ultra-som durante 20 min.,resfriado até à temperatura ambiente e, em seguida, fixado em 10 ml com metanol, misturado e depois transferido para tubos centrífugos, centrifugados a 5000 r/min durante 5 min,e o supernatante filtrado através do 0Membrana orgânica de.45 μm, e depois a ser testada.
2Resultado do experimento.
2.1 Adequação do sistema
Fig. 1 Cromatograma de padrões de 10 mg/l
Quadro 5 Dados de ensaio de normas de 10 mg/l
Compostos | Tempo de conservação | Área de pico | Número teórico da matrícula |
6-metilcoumarina | 11.168 | 574.285 | 15854 |
Nota:O cromatograma e os dados mostram que a 6-metilcoumarina tem uma boa forma de pico e que não existem outros picos ao redor do pico alvo, sendo o número teórico de placas elevado,que satisfaça os requisitos experimentais.
2.2 Curva padrão
Fig. 2 Resultado do ensaio da curva padrão
Nota: O cromatograma mostra que o valor R do coeficiente de correlação da curva da 6-metilcumarina é superior a 0.9999, que satisfaz os requisitos experimentais.
2.3 Repetibilidade
Fig. 3 Cromatograma de Repetibilidade de 3 mg/ L Padrões de 6 injecções
Quadro 6 Dados de repetibilidade de 3 mg/ L Padrões de 6 injecçõesQuadro 6 Dados de repetibilidade de 3 mg/ L Padrões de 6 injecçõess
6-metilcoumarina |
- Não, não. | Tempo de conservação | Área de pico |
1 | 11.159 | 177.710 | |
2 | 11.161 | 176.711 | |
3 | 11.142 | 177.128 | |
4 | 11.152 | 176.985 | |
5 | 11.150 | 177.469 | |
6 | 11.149 | 177.629 | |
RSD ((%) | 0.061 | 0.222 |
Nota: De acordo com os dados do quadro acima, a RSD da repetibilidade do tempo de retenção da 6-metilcoumarina é de 0,061%, e a RSD da repetibilidade da área de pico é de 0,222%.A repetibilidade é boa e satisfaz os requisitos experimentais.
2.4 Limite de detecção
Fig. 4 Cromatograma de ensaio de 0,02 mg/L Padrões
Quadro 7 Dados de ensaio de normas de 0,02 mg/l
Compostos | Tempo de conservação | Área de pico | SNR |
6-metilcoumarina | 11.153 | 1.208 | 19.296 |
Observação: De acordo com os dados acima referidos, o limite de detecção é calculado em 3 vezes a relação sinal/ruído e verificou-se que o limite de detecção da 6-metilcoumarina é de 0,004 mg/L.Ele cumpre os requisitos experimentais.
2.5 Resultado do ensaio de uma amostra cosmética
Fig. 5 Cromatograma de ensaio de uma amostra cosmética
Nota: A 6-metilcumarina não foi detectada numa amostra de cosméticos.
2.6 Atenção
Ao utilizar uma centrífuga de alta velocidade, certifique-se de que os tubos estão colocados simetricamente e que a massa total dos tubos nos lados opostos é a mesma.
3Conclusão
O método analítico introduzido no presente artigo, com referência às Normas Técnicas e de Segurança dos Cosméticos para a detecção da 6-metilcoumarina,utilizando a cromatografia líquida Wayeal de alto desempenho da série LC3200 com detector UVO resultado do experimento mostra que a forma do pico da 6-metilcoumarina é boa no teste de adaptabilidade do sistema e que não existem outros picos ao redor do pico alvo.e o número de placas teóricas é altoO coeficiente de correlação da curva R é superior a 0.9999O RSD da repetibilidade do tempo de retenção da 6-metilcoumarina é de 0,061%, e o RSD da repetibilidade da área de pico é de 0,222%, o que mostra uma boa repetibilidade..004 mg/l. Todos os resultados dos ensaios acima referidos satisfazem os requisitos do instrumento do método padrão.
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